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酶法多肽:
酶法多肽就是利用生物酶解技术将大分子的蛋白“切割”成蛋白质片段——肽的方法。具体就是蛋白质类物质在蛋白酶的催化作用生成氨基酸和多肽。利用酶制剂的特异性酶切位点将蛋白质水解成多肽和氨基酸。其反应条件温和,反应时间短,效率高,不产生消旋作用,也不破坏氨基酸,操作易于控制;产品安全性高,成本较低。目前,此种方法已被广泛应用于工业生产中制备多肽类产品。生物酶解技术是当下制备多肽的一个热门技术,是目前制备生物活性肽的主流方法,目前大多数成品的小分子肽都是应用酶解技术生产的。
酶水解法生产小分子肽的过程中,蛋白酶的选择是关键,不仅要求酶切出所需肽段,又必须符合食品安全。酶解法制备生物活性肽模拟人体降解蛋白质模式进行体外降解,降解产生的小肽与氨基酸吸收部位不同,不会与体内氨基酸的吸收产生竞争。
酶法多肽的特点:
(1)酶解法中蛋白酶的种类有很多,几种常见的蛋白酶有胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶等。蛋白酶催化蛋白质中肽键的水解时,因水解条件(pH、温度、时间等)不同,会影响多肽链的长度、氨基酸顺序和游离氨基酸的数量,从而影响水解产物的生理活性。在制备生物活性肽的方法中,优先使用的方法就是酶水解法,尤其是在食品和药物中,因为其最终产物中残留的有机溶剂和有毒物质较少。而且酶水解是一种在温和条件下进行的方法,酶解条件很容易控制。通过将反应介质调节到酶的最佳pH和温度,可以在连续的酶促反应中使用多种酶进行水解。
(2)产物易于纯化:在工业生产中,纯化成本较高限制了高纯度生物活性肽的生产,可用固定化酶进行水解生产多肽,固定化酶允许在更温和、更受控制的条件下进行酶促水解,可以实现连续生产,而且固定化酶可回收,避免了酶产生次级代谢产物,产物易于分离纯化。
(3)酶解法分为单一酶解法和复合酶解法:单一酶解法是指利用一种酶进行制取肽。一般使用的酶主要分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶三种。由于不同的蛋白酶进行催化最佳反应条件的不同,并且考虑到其他因素的作用和影响,它们最后得到产率也各自不同。复合酶法是在单一酶解方法的基础上,考虑到不同酶相互作用的不同,在最优的条件下进行复配,优化出最佳的配方比例。相对于单一酶解法,复合酶解方法具有时间短、效率高,最终得率也较高的优点。
(4)酶解法的缺点:酶解法制备生物活性肽的过程均会产生苦味肽,蛋白质在酶解过程中会产生一些疏水性氨基酸,这些疏水性氨基酸和舌尖上的苦味受体结合便会产生苦味。酶解蛋白苦味的普遍存在性,使生物活性肽的应用受到了较大的影响。
复合小分子肽主要成分:人参(五年以下人工种植)、牛骨髓肽、海洋鱼低聚肽、牡蛎肽、地龙蛋白肽、苦瓜肽、纳豆粉、菊粉
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